AO染色液 CA1143 索萊寶
Product classification
- 生化試劑
- 分子生物學(xué)試劑
- 蛋白質(zhì)研究
- 免疫學(xué)抗體
- 細(xì)胞相關(guān)產(chǎn)品
- 其他試劑及產(chǎn)品
- 實(shí)驗(yàn)室相關(guān)耗材
- 實(shí)驗(yàn)室服務(wù)
- 生化檢測(cè)試劑盒(常量)
- OMEGA試劑盒代理
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- 葡聚糖凝膠,瓊脂糖凝膠填料系列
- 中藥對(duì)照品 標(biāo)準(zhǔn)品
- 其他生化試劑
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移液器
-
R&D細(xì)胞因子現(xiàn)貨供應(yīng)
- 糖類中間體
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原料藥
- 索橋生化檢測(cè)試劑(微量)
- 索橋生化檢測(cè)(常量)
- 透析膜及相關(guān)產(chǎn)品
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labyeah系列產(chǎn)品
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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
儲(chǔ)存條件 | 2-8℃,避光,有效期6個(gè)月 |
規(guī)格 | 10ml |
單位 | 瓶 |
流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞DNA含量,通過染色定量分析DNA,亦可通過熒光顯微鏡觀察形態(tài)變化。
AO屬于三環(huán)雜芳香燃料,可以標(biāo)記 DNA、RNA,屬于異染性熒光染 料。該染料具有膜通透性,能透過細(xì)胞膜,使核 DNA 和 RNA 染色。因此 AO 常用于細(xì)胞內(nèi) DNA 和 RNA 進(jìn)行檢測(cè)。AO 與核酸結(jié)合方式主要有:1、插入性結(jié)合,AO 嵌入核酸雙鏈的堿基對(duì)之間, 這種結(jié)合方式主要為 AO 與 DNA 的結(jié)合,其熒光發(fā)射峰為 530nm,激發(fā)后呈綠色熒光;2、靜電吸 引,帶正電荷的 AO 與單鏈核酸的磷酸根(帶負(fù)電荷)產(chǎn)生靜電間的吸引結(jié)合,這種結(jié)合方式主要為 AO 與 RNA 的結(jié)合,其熒光發(fā)射峰為 640nm,激發(fā)后呈紅色熒光,少量結(jié)合會(huì)呈桔黃色或桔紅色熒 光。因此,AO嵌合到雙鏈 DNA 分子中顯綠色,與 DNA 單鏈或 RNA 結(jié)合時(shí)發(fā)桔黃色或橙紅色 熒光。
AO染色液(1mg/ml)為儲(chǔ)存液,使用時(shí)應(yīng)稀釋到合適濃度后使用。染色后在熒光顯微鏡下觀 察,AO可透過正常細(xì)胞膜,使細(xì)胞核呈綠色或黃綠色均勻熒光;而在凋亡細(xì)胞中,因染色質(zhì)固 縮或斷裂為大小不等的片斷,形成凋亡小體。AO使其染上致密濃染的黃綠色熒光或黃綠色碎片 顆粒;而壞死細(xì)胞黃熒光減弱甚至消失。AO染色常與 EB 染色合用雙染,因 EB 只染死細(xì)胞使 之產(chǎn)生桔黃色熒光,由此可區(qū)分出正常細(xì)胞、凋亡細(xì)胞及壞死細(xì)胞。
自備材料
熒光顯微鏡,低速離心機(jī) ,PBS,細(xì)胞計(jì)數(shù)板 ,載玻片、蓋玻片
操作步驟(僅供參考):
1、 收集細(xì)胞(采用流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí),應(yīng)先固定細(xì)胞),用 PBS 清洗細(xì)胞 1 次,計(jì)數(shù)并調(diào)節(jié)細(xì)胞濃 度至 106/ml。
2、 取適量的細(xì)胞懸液,加入 AO Stain(1mg/ml),使 AO 終濃度為 8.5~17µg/ml,輕輕混 勻。
3、 室溫避光染色 15~20min,滴加于載玻片上并加蓋玻片或上流式細(xì)胞儀分析。
4、 熒光顯微鏡下觀察(激發(fā)濾光片波長(zhǎng) 488nm,阻斷濾光片波長(zhǎng) 515nm),計(jì)數(shù)并拍照。
注意事項(xiàng):
1、 AO Stain(1mg/ml)不含破膜劑,較少單獨(dú)使用。
2、 AO染色常與 EB 染色合用,可區(qū)分出正常細(xì)胞、凋亡細(xì)胞及壞死細(xì)胞。
3、 如有低溫離心機(jī)進(jìn)行離心效果更佳。
4、 操作過程中應(yīng)注意減少試劑暴露于強(qiáng)光下的時(shí)間。
5、 試劑有一定毒性,請(qǐng)小心操作。
6、 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
備注:以上數(shù)據(jù)均來(lái)自公開文獻(xiàn), Solarbio暫未進(jìn)行獨(dú)立驗(yàn)證, 僅供參考。These protocols are for reference only. Solarbio does not independently validate these methods.